本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種以纖維素為原料發(fā)酵生產(chǎn)丁醇的方法。本發(fā)明方法包含以下步驟：纖維素的預(yù)處理及酶水解、纖維素水解液的脫毒、發(fā)酵培養(yǎng)基的配制、丁醇生產(chǎn)微生物種子液的制備、接種和發(fā)酵。纖維素水解液的脫毒是用強(qiáng)酸性苯乙烯系陽(yáng)離子交換樹脂進(jìn)行脫毒。本發(fā)明工藝路線簡(jiǎn)單、可靠，成本低廉，易于工業(yè)化。

1.一種以纖維素為原料發(fā)酵生產(chǎn)丁醇的方法，其特征是包含以下步驟：纖維素的預(yù)處理及
酶水解、纖維素水解液的脫毒、發(fā)酵培養(yǎng)基的配制、丁醇生產(chǎn)微生物種子液的制備、接
種和發(fā)酵，所述的纖維素為玉米芯，水解液的脫毒方法為用強(qiáng)酸性苯乙烯系陽(yáng)離子交換
樹脂進(jìn)行脫毒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種以纖維素為原料發(fā)酵生產(chǎn)丁醇的方法，其特征是：具體生產(chǎn)
步驟為：
1）纖維素粉的預(yù)處理及酶水解：纖維素烘干、打粉、過(guò)篩，將纖維素粉與0.5%(v/v)的
稀硫酸按質(zhì)量/體積比為1：10的比例混合，110℃作用15min，冷卻至室溫后用Ca(OH)₂
調(diào)pH為4.8，加入纖維素酶，50℃作用2～3d，反應(yīng)結(jié)束后，離心除去固體物質(zhì)，上清
即為纖維素水解液；
2）纖維素水解液的脫毒：將水解液通過(guò)活化好的陽(yáng)離子樹脂交換柱；
3）發(fā)酵培養(yǎng)基的配制：每升脫毒液中加入1g?CH₃COO(NH₄)、0.2g?MgSO₄、0.6g?KH₂PO₄，
用Ca(OH)₂調(diào)pH為7.0，離心除去沉淀，取上清加入到厭氧瓶中，每升上清液中加入
2.5g～3.5g豆粕作為發(fā)酵氮源；向厭氧瓶中充氮?dú)馊コ鯕猓w好內(nèi)外塞，滅菌備用；
4）種子液的制備：將玉米粉與自來(lái)水按質(zhì)量/體積比為1：15～20的比例混合均勻，煮
成糊狀，補(bǔ)足蒸發(fā)水分后，分裝到厭氧管中，充氮?dú)馊コ鯕夂?21℃滅菌60min，即
配制成種子培養(yǎng)基；在保存有丙酮丁醇梭菌菌種的種子培養(yǎng)基中吸取孢子液，按體積/
體積為1：8～1：12的比例接種到新配制的種子培養(yǎng)基中，沸水浴熱擊90s，37℃靜止
培養(yǎng)23h～25h；
5）接種和發(fā)酵：將步驟4）制備的種子液接種到步驟3）制備的發(fā)酵培養(yǎng)基中，每升發(fā)
酵培養(yǎng)基中加入80ml～120ml種子液，同時(shí)加入10ml～20ml維生素混合液，37℃靜止
發(fā)酵60h～72h。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的以纖維素為原料生產(chǎn)燃料丁醇的方法，其特征是：維生素混合液
由生物素、維生素B1、煙酸、維生素B6和肌醇組成，其在混合液中的終濃度為生物素
0.01gL^-1、維生素B10.8gL^-1、煙酸0.8gL^-1、維生素B60.8gL^-1、肌醇2gL^-1，自來(lái)水配
制后過(guò)濾除菌，4℃保存?zhèn)溆谩?br/>