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一種動態實時測量細胞膜電位的裝置

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-06
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201410133539.4 
  • 技術(專利)名稱 一種動態實時測量細胞膜電位的裝置 
  • 項目單位 西安電子科技大學
  • 發明人 張鵬,黃辰,張毅奕,馬曉華,郝躍 
  • 行業類別
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 陳芳萍
  • 發布時間 2021-07-06  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種動態實時測量細胞膜電位的裝置,包括:用于作為生物傳感器的氮化鎵(GaN)高電子遷移率晶體管(HEMT)器件、微流室、微注射泵和儲液瓶。微流室、微注射泵和儲液瓶依次連接,構成一個封閉的循環系統。微流室作為液體流動和細胞注入之用,微流室內的液體通過微注射泵傳輸給儲液瓶。作為生物傳感器的HEMT器件與微流室耦合,用于檢測所述微流室內細胞在動態條件下的實時細胞膜電位。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種動態實時測量細胞膜電位的裝置,包括:用于作為生物傳感器的氮化鎵(GaN)高
    電子遷移率晶體管(HEMT)器件、微流室、微注射泵和儲液瓶,其特征在于,將所述微流室、微
    注射泵和儲液瓶依次連接,構成一個封閉的循環系統;所述微流室作為液體流動和細胞注
    入之用,所述微流室內的液體通過所述微注射泵傳輸給所述儲液瓶,所述作為生物傳感器
    的HEMT器件與所述微流室耦合,用于檢測所述微流室內細胞在動態條件下的實時細胞膜電
    位,所述實時細胞膜電位是根據HEMT器件的源漏電流計算得到的;在所述微流室內,根據檢
    測的實時流量數據,計算該流量下的剪切力,最后通過該流量數據與實時監控的細胞膜電
    位相結合,實現模擬實際生物血管流體環境下的細胞膜電位的檢測。
    2.根據權利要求1所述的裝置,其中所述的HEMT器件由底層到上層的累積層依次為藍
    寶石襯底層、GaN緩沖層、AlN插入層、AlGaN勢壘層、GaN帽層和Si3N4鈍化層;其中所述GaN緩
    沖層厚度為1.6μm;所述的AlN插入層厚度為1.2nm;所述的AlGaN勢壘層厚度為8~15nm;所
    述的GaN帽層厚度為1.5nm;所述的HEMT器件的勢壘層鋁組分在25%~40%之間;所述的
    HEMT器件的鈍化層中間有一塊長方形槽狀的裸柵區域;所述的HEMT器件的裸柵區域無電極
    引出,尺寸在10μm~10mm范圍內;所述的HEMT器件的上方的覆蓋物的材質為高分子聚合材
    料,形狀為與裸柵相同的槽狀圖形。
    3.根據權利要求2所述的裝置,其中所述的微流室安裝在HEMT器件與高分子聚合材料
    形成的槽形空間內,微流室反應室尺寸設計與器件柵極圖形保持一致。
    4.根據權利要求3所述的裝置,其中所述的微流室的制造材料選用以下中的任一種:聚
    二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、以及聚酰亞胺;微流室包括其兩側的封接口,微流室與
    微注射泵連接。
    5.一種用于如權利要求1所述的裝置的HEMT器件,其特征在于,其是通過以下步驟來構
    造的:
    1)臺面刻蝕,即采用ICP方法刻蝕異質結材料形成器件的臺面隔離;
    2)淀積源漏極歐姆金屬,采用電子束蒸發的方法獲得歐姆金屬層,歐姆金屬采用Ti/
    Al/Ni/Au四層結構,并在830℃下退火形成合金,獲得良好的源漏極歐姆接觸;
    3)采用PECVD方法淀積Si3N4材料作為鈍化層;
    4)光刻并采用ICP方法刻蝕Si3N4,露出裸柵區域。
    6.一種用于如權利要求1所述的裝置的微流室,其特征在于,其是通過以下步驟來構造
    的:
    1)采用光刻的方法或反應離子刻蝕的方法制造出微流室凸突的陽模,然后在陽模上澆
    鑄PDMS,在約50℃下固化后使PDMS從陽模上剝離,即制得微流室部件;
    2)微流室兩端的小孔采用鉆孔法得到;
    3)微流室部件與HEMT芯片封接工藝采用熱壓法或粘合法。
    7.根據權利要求1所述的裝置測量細胞膜電位的方法,所述方法包括步驟:
    1)在無菌條件下,將獲取的新鮮的人體臍帶靜脈血加入等體積比的1g/L膠原酶與
    2.5g/L胰蛋白酶的混合液15mL,置于37℃水浴箱中孵育8min;
    2)將步驟1)得到的液體收集入離心管,用磷酸鹽緩沖液沖洗臍靜脈2次,將沖洗后的液
    體一同收集入離心管,1000r/min離心10min,取上清液,加入完全培養液重懸細胞;
    3)取0.1mL細胞懸液用4g/L臺盼藍染色后作活細胞計數;
    4)將2×104/L細胞接種到24孔板中,每孔加入完全培養液1mL,置于37℃、950mL/L O2
    50mL/L CO2培養箱內靜置培養,并采用臺盼藍排斥法,將0.1mL混勻的內皮細胞懸液與4g/L
    臺盼藍0.9mL混勻后,取1滴在顯微鏡下計數100個細胞;
    5)用酒精對HEMT器件消毒后,使用纖連蛋白溶液進行處理30min,并使用磷酸鹽緩沖液
    沖洗,然后接種細胞,使細胞密度達到5000~12000cells/mm2,并保證細胞全程置于含5%
    CO2的37℃恒溫箱中;
    6)采用微注射泵與細胞膜電位檢測裝置連接形成血液動力系統,該系統架設在37℃恒
    溫箱中維持溫度穩定,實驗中使用磷酸鹽緩沖液作為流體,并且實驗全程通入含5%CO2
    空氣以保持流體環境的酸堿度;
    7)器件裸柵上培養的細胞受到的剪切力由以下公式推導:
    <mrow> <mi>&tau;</mi> <mo>=</mo> <mfrac> <mrow> <mn>6</mn> <mi>Q</mi> <mi>&eta;</mi> </mrow> <mrow> <msup> <mi>wh</mi> <mn>2</mn> </msup> </mrow> </mfrac> </mrow>
    其中τ為細胞受到的剪切力,單位為dyne/cm2;η為流體即培養液的粘滯度(viscosity),
    單位為g/(cm·s);Q為流體每秒的流量,單位為cm3/s;w為器件的柵寬,h為微流室內壁高
    度;
    8)采用半導體測試分析儀器,來測試HEMT器件的源漏電流,并通過如下公式,轉化成對
    應的細胞膜電位:
    <mrow> <msubsup> <mi>V</mi> <mi>J</mi> <mi>D</mi> </msubsup> <mo>=</mo> <msub> <mi>&Delta;V</mi> <mrow> <mi>G</mi> <mi>S</mi> </mrow> </msub> <mo>=</mo> <mfrac> <mrow> <msub> <mi>&Delta;I</mi> <mrow> <mi>D</mi> <mi>S</mi> </mrow> </msub> </mrow> <msub> <mrow> <mo>(</mo> <msub> <mi>g</mi> <mi>m</mi> </msub> <mo>)</mo> </mrow> <msub> <mi>V</mi> <mrow> <mi>D</mi> <mi>S</mi> </mrow> </msub> </msub> </mfrac> </mrow>
    其中,為細胞膜電位,為所加漏源電壓VDS下,且柵電壓VGS在-70mV~0V處對
    應的HEMT器件跨導,由于柵電壓的變化較小,可認為為一個常數,由預先測量得到。
    8.根據權利要求7所述的測量細胞膜電位的方法,所述預先測量為:對在同一晶圓上、
    且采用相同版圖的常規三端HEMT器件,加相同漏源電壓VDS,測試其轉移曲線(VG-ID),得到
    柵電壓在-70mV~0V處對應的器件跨導值。
    展開

專利技術附圖

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