本發(fā)明涉及一種近紅外及雙光子雙模式成像熒光探針的制備及應用，屬于化學生物學技術領域。本發(fā)明的近紅外及雙光子雙模式成像熒光探針是以尼羅紅衍生物和生物素為原料合成的，是一種棕色產物。本發(fā)明的熒光探針，具有良好的光譜性質，分別用540nm和590nm作為激發(fā)波長，在660nm處出現(xiàn)最大發(fā)射波長，且熒光強度較高。本發(fā)明的熒光探針，還對腫瘤細胞有靶向作用，是一種靶向近紅外熒光探針；一方面在不破壞組織樣品的前提下能夠實現(xiàn)實時檢測體內信號；另一方面能夠提高信號在腫瘤內的富集，提高信噪比。本發(fā)明的熒光探針既可以進行近紅外成像，同時也能夠進行雙光子成像，兩種模式相互驗證，能提高結果的準確性。

1.一種用于細胞的熒光成像或/和雙光子成像的近紅外熒光探針，其化學結構式如式
（ I） 所示：

式（ I） 中，R₁=R₂=CH₃。
2.一種權利要求1所述的近紅外熒光探針的制備方法，其特征在于，是將化合物2、化合
物3、1-羥基苯并三唑、N,N-二異丙基乙胺和N,N-二甲基甲酰胺混合，反應結束后分離純化，
得棕色產物；
化合物2的結構式：，
化合物3的結構式：；
所得棕色產物即為近紅外熒光探針。
3.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于，采用薄層色譜分析檢測法檢測反應進
程，或者，反應24h以上。
4.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于，使用硅膠柱進行分離純化。