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一組微擬球藻的檢測探針

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-06-28
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310646550.6 
  • 技術(專利)名稱 一組微擬球藻的檢測探針 
  • 項目單位 江南大學
  • 發明人 楊海麟,王武,辛瑜,夏小樂,張玲,鞏波 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 錢瀟
  • 發布時間 2021-06-28  
  • 01

    項目簡介

    一組微擬球藻的檢測探針,屬于核酸檢測領域。依據微擬球藻rRNA保守序列設計成三條相互關聯的寡核苷酸探針,針對微擬球藻18SrRNA特定區域設計的分析探針SEQIDNO:1,在S1酶保護下與此區域保守序列特異性結合,進行生物信息學比對時僅與微擬球藻18SrRNA在1610~1790區域核苷酸互補,而與其他藻類在內的真核微生物無同源性,其長度為60bp;捕獲探針SEQIDNO:2,與分析探針的3’端互補,在5'端有生物素Biotin標記;信號探針SEQIDNO:3,與分析探針的5'端互補,在5'端有異硫氰酸FITC標記。本發明用于培養體系中微擬球藻的檢測,特異性高,實用性好,在每毫升海水0.18×10~2.1×10個微擬球藻細胞數范圍內,檢測信號與藻細胞數呈線性關系,可用于規模化微藻養殖過程中微擬球藻的過程監測。
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  • 02

    說明書

    1.一組微擬球藻(Nannochloropsis?sp.)的檢測探針,其特征在于該檢測探針由三種寡核苷酸探針組成,針對微擬球藻18S?rRNA特定區域設計的分析探針SEQ?ID?NO:?1,在S1酶保護下與此區域保守序列特異性結合;捕獲探針SEQ?ID?NO:2?用于結合在載體上并與所述分析探針3’端特異性結合;信號探針SEQ?ID?NO:3?用于捕獲S1酶酶切處理和變性處理后溶液內的分析探針,檢測信號與藻細胞數目呈現線性關系R2=0.9922。2.根據權利要求1所述的微擬球藻的檢測探針,其特征在于分析探針具有SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列,長度為60bp,在進行生物信息學比對時其僅與微擬球藻18S?rRNA在1610~1669區域核苷酸互補,BLAST結果表明100%同源性序列皆為微擬球藻屬,并且無99%同源性序列,而與其他藻類在內的真核微生物無同源性,在一定條件下可特異結合于微擬球藻rRNA上;其GC%=41.7%,△G=?-3.68?kcal/mol。3.根據權利要求1所述的微擬球藻的檢測探針,其特征在于捕獲探針具有SEQ?ID?NO:2所示的核苷酸序列,長度為21bp,GC%=42.9%,△G=?-0.73?kcal/mol,所述捕獲探針結合于分析探針3'端,在其5'端具有生物素標記。4.根據權利要求1所述的微擬球藻的檢測探針,其特征在于信號探針具有SEQ?ID?NO:3所示的核苷酸序列,長度為21bp,GC%=42.9%,△G=?-0.32?kcal/mol,與分析探針的5'端互補,其5'端具有檢測信號標記,所述標記是異硫氰酸FITC標記。
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專利技術附圖

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