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與小麥葉片葉綠素含量和粒重相關的基因、其Indel標記及應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-18
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510613327.0 
  • 技術(專利)名稱 與小麥葉片葉綠素含量和粒重相關的基因、其Indel標記及應用 
  • 項目單位 安徽農業大學
  • 發明人 朱曉峰,常成,張海萍,曹佳佳,張衡,張禮廉,曹雪蓮,盧杰,司紅起,馬傳喜 
  • 行業類別 醫藥制造-生物藥品
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 孫群歡
  • 發布時間 2021-07-18  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及與小麥葉片葉綠素含量和粒重相關的基因及其Indel標記。本發明首次從小麥中分離克隆到與小麥葉片葉綠素含量和粒重相關的基因,并根據所克隆的基因序列,在‘京411’和‘紅芒春21’兩個品種間開發出具有多態性的Indel標記,并在194份小麥自然品種中分析其對表型的作用,最終開發出與基因共分離的,且與小麥葉片葉綠素含量和粒重緊密相關的功能標記。該Indel標記能夠分別解釋小麥花后旗葉葉綠素含量及千粒重表型變異的8.2%和4.4%,其中,分子量大小為494bp(Seq ID No.3)的條帶對粒重的增加具有增效作用,分子量大小為493bp(Seq ID No.4)的條帶對粒重的降低具有增效作用。
    展開
  • 02

    說明書

    1.與小麥花后旗葉葉片葉綠素含量和千粒重相關基因TaBAS1-2B共分離的Indel標記,
    其特征在于,用于擴增所述Indel標記的引物對為:
    上游引物F:5’-CGCAGTGCCTGTCGTTTC-3’
    下游引物R:5’-TCACATACTTCTTCCCAAT-3’
    所述引物對擴增的與小麥花后旗葉葉片較高葉綠素含量和較高千粒重相關的Indel標
    記特征條帶為494bp,其核苷酸序列如Seq ID No.3所示;所述引物對擴增的與小麥花后旗
    葉葉片較低葉綠素含量和較低千粒重相關的Indel標記特征條帶為493bp,其核苷酸序列如
    Seq ID No.4所示。
    2.權利要求1所述Indel標記在篩選花后旗葉具有較高葉綠素含量和較高千粒重的小
    麥種質資源中的應用,其特征在于,包括如下步驟:
    1)提取待測植株的基因組DNA;
    2)以待測植株的基因組DNA為模板,利用權利要求1所述引物F和R,進行PCR擴增反應;
    3)檢測PCR擴增產物,如果能夠擴增出如Seq ID No.3所示核苷酸序列的特征條帶,則
    待測植株為花后旗葉葉片具有較高葉綠素含量和較高千粒重的小麥資源。
    3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,步驟2)中PCR反應使用的擴增體系以10μl
    計為:模板DNA 100ng,10μM引物F和R各0.2μl,2.5mM dNTP 0.8μl,5U/μl Taq DNA聚合酶
    0.12μl,含25mM Mg2+的10×PCR反應緩沖液1.0μl,ddH2O補足至10μl。
    4.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,步驟2)中PCR反應使用的擴增程序為:94℃
    5分鐘;94℃ 50秒,58℃ 50秒,72℃ 3分鐘,36個循環;72℃ 10分鐘。
    5.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,步驟3)中采用6%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
    檢測PCR擴增產物,然后銀染顯色。
    展開

專利技術附圖

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