本發明公開了一種牛樟芝化合物組分分離提取方法，以牛樟芝子實體粉或菌絲體為原料，采用酶解、超臨界CO萃取、離子交換色譜、膜分離超濾和層析法純化相結合的技術實現牛樟芝化合物組分的分離提取。本發明具有有效活性組分分離效果好，純化純度高，成分不易被分解破壞、無有害化學試劑和重金屬殘留、提取效率高等優點，可以同時脫除多糖液中的鹽分和水，實現對多糖和三萜類化合物稀溶液的純化和分離，作為新原料、中間體應用于功能食品、保健食品、藥品、化妝品等產業的研究開發。本發明具有很高的工業應用價值，是一項既環保、經濟又可工業化生產的現代生物醫藥活性物質的制備技術。

1.一種牛樟芝化合物組分分離提取方法，其特征在于：以牛樟芝子實體粉或菌絲體為
原料，采用酶解、超臨界CO₂萃取、離子交換色譜、膜分離超濾和層析法純化相結合的技術實
現牛樟芝化合物組分的分離提取；
具體步驟如下：
（1）將合格牛樟芝干燥至水分含量≤8%，粉碎，過20-30目篩；
（2）將牛樟芝粉用純化水浸泡，料液比為1：10-12，調節pH=4.5-5.5，溫度50-60℃，時間
6h；加入淀粉酶和木聚糖酶，攪拌均勻，超聲輔助酶解2-3h；將料液升溫至100℃，滅酶2-
3min，然后將料液采用100目膜過濾，得酶解提取液（1）；
（3）在步驟（2）的濾渣中加入其重量10倍的純化水，攪拌均勻，再加入纖維素酶，酶解2-
3h，將料液升溫至100℃，滅酶2-3min，然后將料液采用100目膜過濾，得酶解提取液（2）；
（4）將酶解提取液（1）和酶解提取液（2）合并，混合均勻，0.09MPa減壓濃縮至可溶性固
形物含量為10-12%，濃縮液的濃度Brix=16.0-18.0%；
（5）將濃縮液采用超臨界CO₂萃取，條件為：萃取釜壓力25-30MPa，萃取溫度50-55℃，分
離溫度40℃，I級分離釜壓力8-10MPa，Ⅱ級分離釜壓力6MPa，CO₂流速2-2.5L/min，萃取時間
4-5h，分離釜收集得到牛樟芝化合物組分的綜合萃取物；
（6）綜合萃取物采用離子交換色譜和凝膠層析進行分離，經過凝膠層析后，吸附部分得
α-葡聚糖苷酶，未吸附部分得β-葡聚糖苷酶；
（7）綜合萃取物采用膜分離超濾技術分離提取純多糖部分；
（8）綜合萃取物采用硅膠薄層層析分離，經脫水分餾，得三萜類化合物。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（2）中所述的淀粉酶的酶活力為20萬
U/g，木聚糖酶的酶活力為12萬U/g，用量分別為牛樟芝粉重量的0.1-0.2%；超聲波頻率為
25-30kHz。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）中所述的纖維素酶的酶活力為20
萬U/g，用量為濾渣重量的0.2-0.3%。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（6）的具體步驟包含如下步驟：
（1）將葡聚糖凝膠在7-10倍量的蒸餾水中充分溶脹1-2小時；
（2）將凝膠裝填入垂直的層析柱中，柱長100cm，直徑5cm；
（3）萃取物濃縮液體積為凝膠總床體積的15%-20%，萃取物濃縮液與洗脫液的相對粘度
為1.5-2。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（7）的工藝參數如下：超濾膜為中空纖
維式納米膜，中空纖維外徑0.4-2.0mm，內徑0.3-1.4mm，過濾精度0.005-0.01μm；超濾溫度
為25℃，pH值接近浸提介質的pH，超濾壓力為0.15-0.18MPa。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（8）的具體步驟包含如下步驟：
（1）用95wt.%乙醇溶液浸漬2h，溫度40-45℃，回流2次，將體積比為10：3：1的甲苯-乙酸
乙酯-乙酸作為展開劑；
（2）采用多次洗脫，收集的規格：上液量200g，200-300目的硅膠50g，50ml收一餾分。