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毛竹種胚誘導愈傷組織形成的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-13
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510297831.4 
  • 技術(專利)名稱 毛竹種胚誘導愈傷組織形成的方法 
  • 項目單位 安徽農業大學
  • 發明人 項艷,趙康,李媛,陳丹梅,王依依 
  • 行業類別 中藥材獲取-植物藥材種植
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 秦丹妮
  • 發布時間 2022-02-13  
  • 01

    項目簡介

    毛竹種胚誘導愈傷組織形成的方法,包括以下步驟:(1)篩選出生活力高于75%的毛竹種子;(2)取出篩選出的毛竹種子的種胚,切除50%以上的胚乳,依次用流水、乙醇、無菌水、次氯酸鈉溶液、無菌水、加有吐溫?80的升汞進行處理,再去除表面水分備用;(3)將消毒后的種胚接種到誘導培養基上,暗培養7—10天使愈傷組織形成,然后將愈傷組織分離出來,接種到增殖培養基上增殖培養20—30天即可。本發明選取毛竹種子的種胚作為外植體,可以直接將毛竹種子的外種皮與內在種胚之間的縫隙處藏納的污垢、泥土和細菌等污染物去除,從而有效降低污染率。本發明愈傷組織誘導率可以達到64.3%,而污染率能控制在20%以下,并且愈傷組織的形態優良,生長狀態好。
    展開
  • 02

    說明書

    1.毛竹種胚誘導愈傷組織形成的方法,包括以下步驟:
    (1)種子的篩選
    取毛竹種子,剝去外稃,采用TTC染色法對毛竹種子進行生活力測定,篩選出生活力高
    于75%的毛竹種子;
    (2)種胚的消毒
    取出篩選出的毛竹種子的種胚,切除50%—70%的胚乳,用流水沖洗2—4小時,然后置
    于70—75%(v/v)乙醇中浸泡2—4分鐘,再用無菌水沖洗至表面光滑、背部溝槽中無明顯異
    物,然后于無菌條件下,置于1—2%(v/v)次氯酸鈉溶液中浸泡振蕩15—20分鐘,再用無菌
    水沖洗至表面光滑、背部溝槽中無明顯異物,最后于無菌條件下,置于0.05—0.1%(w/v)升
    汞中,每升升汞還加有3—5滴吐溫-80,浸泡振蕩30—40分鐘,再去除表面水分備用;
    (3)愈傷組織的誘導與增殖
    將消毒后的種胚接種到誘導培養基上,暗培養7—10天使愈傷組織形成,然后將愈傷組
    織分離出來,接種到增殖培養基上增殖培養20—30天即可;
    所述誘導培養基是以N6/B5/MS復合培養基為基礎,添加3—5mg/L的2,4-D、0.1—
    0.3mg/L的ZT,500mg/L的脯氨酸、500mg/L的谷氨酰胺和300mg/L的水解酪蛋白,所述N6/B5/
    MS復合培養基包括1900mg/L的硝酸鉀、1650mg/L的硝酸銨、170mg/L的磷酸二氫鉀、370mg/L
    的七水合硫酸鎂、440mg/L的二水合氯化鈣、0.75mg/L的碘化鉀、3.0mg/L的硼酸、10.0mg/L
    的一水合硫酸錳、2.0mg/L的七水合硫酸鋅、0.25mg/L的二水合鉬酸鈉、0.025mg/L的六水合
    氯化鈷、0.025mg/L的五水合硫酸銅、37.25mg/L的乙二胺四乙酸二鈉、27.85mg/L的七水合
    硫酸亞鐵、0.1mg/L的鹽酸硫胺素、0.5mg/L的鹽酸吡哆醇、0.5mg/L的煙酸、2.0mg/L的甘氨
    酸、28g/L的蔗糖和8g/L的瓊脂;
    所述增殖培養基是以MS培養基為基礎,添加3—5mg/L的2,4-D、500mg/L的脯氨酸、
    500mg/L的谷氨酰胺和300mg/L的水解酪蛋白。
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