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一種番茄幼胚培養方法及其培養基

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-03
  • 技術成熟度:正在研發
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710765416.6 
  • 技術(專利)名稱 一種番茄幼胚培養方法及其培養基 
  • 項目單位 河南質量工程職業學院
  • 發明人 徐明磊,劉冠楠,孫亞楠,張旭偉,姚會敏,李紅艷,翟賽亞,張雯雯,王艷曉,王婷婷,徐迅 
  • 行業類別 中藥材獲取-植物藥材種植
  • 技術成熟度 正在研發
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 尤泳虹
  • 發布時間 2022-02-03  
  • 01

    項目簡介

    本發明屬于幼胚培養技術領域,公開了一種番茄幼胚培養方法及其培養基,包括消毒操作:采摘番茄幼果,先經自來水充分沖洗,再用10%次氯酸鈉表面滅菌15min,然后用無菌水沖洗3?5次完成消毒操作。無菌接種:在無菌條件下進行取出幼胚、無菌接種,每瓶接種10個幼胚,隨時觀察生根生芽情況。對結果進行統計和比較。培養幼胚:接種后在培養溫度25士1℃,每天光照12h,進行人工培養。幼苗轉瓶:番茄幼苗生長,進行轉瓶,使每瓶幼苗數在5株。煉苗:移栽前要打開瓶口,陰處放置1?3天進行煉苗,幼苗移栽:苗高到5?7cm時進行移栽,取出移栽到裝有營養土的營養缽中,澆足水,保持高濕度。5?7d后,再生植株即可正常生長發育。
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  • 02

    說明書

    1.一種番茄幼胚培養方法,其特征在于,所述番茄幼胚培養方法包括:步驟一,消毒操作:采摘目的番茄幼果,先經自來水充分沖洗,再用10%次氯酸鈉表面滅菌15min,然后用無菌水沖洗3-5次完成消毒操作;步驟二,無菌接種:在無菌條件下進行取出幼胚、無菌接種于培養基上,每瓶接種10個幼胚,隨時觀察生根生芽情況;步驟三,培養幼胚:接種后在培養溫度24-26℃,每天光照12h,光照強度2500LX下進行人工培養;步驟四,幼苗轉瓶:番茄幼苗生長,進行轉瓶,使每瓶幼苗數在5株;步驟五,煉苗:移栽前要打開瓶口,陰處放置1-3天進行煉苗;步驟六,幼苗移栽:苗高到5-7cm時進行移栽,取出移栽到裝有營養土的營養缽中,澆足水;5-7d后,再生植株即可正常生長發育;所述培養基以MS為基本培養基附加1.0mg/L 6-BA、1.0mg/L GA3、0.2mg/L IAA的培養基組合。2.如權利要求1所述番茄幼胚培養方法,其特征在于,所述番茄幼胚是胚齡為授粉后30天的未發育成熟胚。3.如權利要求1所述番茄幼胚培養方法,其特征在于,所述培養基的配制方法為:步驟1,培養基母液的配制和保存; ①ⅣA肌醇 20000②ⅣB 以上各種營養成分的用量,除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外,其余的均為200倍濃縮液;上述幾種母液都要單獨配成1L的貯備液;其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每種母液中的幾種成分稱量完畢后,分別用少量的蒸餾水徹底溶解,然后再將它們混溶,最后定容到1L;母液Ⅲ的配制方法是:將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解,然后將兩種溶液混合,并將pH調至5.5,最后定容到1L,保存在棕色玻璃瓶中;各種母液配完后,分別用玻璃瓶貯存,并且貼上標簽,注明母液號、配制倍數、日期,保存在冰箱的冷藏室中;(5)生長調節劑為了幼胚健康生長,培養基中加入生長調節劑:IAA、6-BA、GA3,并且分別配成0.1mg/mL母液;其配制方法是:分別稱取這3種物質各10mg,將GA3和IAA用1mL無水乙醇預溶,將6-BA用1mL 0.1mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,最后分別定容至100mL,即得0.1mg/mL的母液;步驟2,配制培養液;用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量:母液Ⅰ為50mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5mL;再取GA3 8mL、IAA 2mL、6-BA 10mL,與各種母液一起放入燒杯中;步驟3,融化瓊脂;用粗天平分別稱取瓊脂7g、蒸糖25g,放入1 000mL的燒杯中,再加入蒸餾水750mL,用電爐加熱,邊加熱邊用玻璃棒攪拌,直到液體呈半透明狀;然后再將配好的混合培養液加入到煮沸的瓊脂中,最后加蒸餾水定容至1 000mL,攪拌均勻;步驟4,調pH;用滴管吸取物質的量濃度為1mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培養基中,邊滴邊攪拌,一直到培養基的pH為5.8為止,培養基的pH必須嚴格控制為5.8;步驟5,培養基的分裝;融化的培養基應趁熱分裝;分裝時,先將培養基倒入燒杯中,然后將燒杯中的培養基倒入50mL或100mL的錐形瓶中;注意不要讓培養基沾到瓶口和瓶壁上;錐形瓶中培養基的量為錐形瓶容量的1/5~1/4;每1000mL培養基,可分裝25~30瓶;培養基分裝完畢后,及時用2塊硫酸紙中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口,并用線繩捆扎;每塊硫酸紙大小為9cm×9cm;步驟6,高壓滅菌;待需要滅菌的物品碼放完畢,蓋上鍋蓋;在98kPa、121.3℃下,滅菌20min;滅菌后取出錐形瓶,讓其中的培養基自然冷卻凝固,放置1d后再使用。4.一種權利要求3所述的番茄幼胚培養基配制方法配制的培養基。
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專利技術附圖

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