本發(fā)明公開了一種胎鼠肺來源內(nèi)皮祖細胞的分離培養(yǎng)方法，包括將孕鼠的受孕子宮放入青霉素和鏈霉素雙抗的預冷PBS中浸泡，取出胎鼠放入度青霉素和鏈霉素雙抗的預冷PBS的平皿中，洗滌；取出肺組織放入PBS并破碎，用0.25％胰酶消化步驟以上中的破碎組織，用含10％FBS的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，離心分離，取其沉淀，用含生長因子和2％FBS的血清的EBM?2培養(yǎng)基懸起，以106/ML細胞濃度接種于6孔板中，置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，當原代細胞生長融合達80?90％時，用0.25％的胰酶消化傳代培養(yǎng)，直至細胞呈現(xiàn)均一形態(tài)，完成培養(yǎng)。

1.一種胎鼠肺來源內(nèi)皮祖細胞的分離培養(yǎng)方法，包括以下步驟： （1）取胎鼠的肺臟，放入含有 500U-1000U青霉素和鏈霉素雙抗的預冷 PBS 中，并將肺組織破碎；（2）用胰酶消化步驟（1）中的破碎組織；（3）消化完后，用含F(xiàn)BS的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)15-18小時；（4）然后取出非貼壁的細胞，離心，取其沉淀；（5）將步驟（4）的沉淀用含生長因子和FBS的血清的EBM-2培養(yǎng)基懸起，接種于孔板中，置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；（6）每2-4 天換一次液，當原代細胞生長融合達 80-90% 時，用胰酶消化傳代培養(yǎng)，持續(xù)傳代直至細胞呈現(xiàn)均一形態(tài)即完成培養(yǎng)；其中，所述胎鼠獲得包括：（A）將孕鼠麻醉后取出串珠樣受孕子宮，放入含有 500U-1000U 青霉素和鏈霉素雙抗的預冷 PBS 中浸泡；（B）將浸泡后的受孕子宮分離出連接胎鼠肚臍與胎盤的臍帶組織后，胎鼠放入含有500U-1000U 高強度青霉素和鏈霉素雙抗的預冷 PBS 的平皿中，洗滌后得到胎鼠。2.如權(quán)利要求1所述的方法，步驟（2）中所述洗滌，其洗滌次數(shù)為2次。3.如權(quán)利要求1的方法，步驟（2）中所述的胰酶為0.25%胰酶，步驟（3）中DMEM培養(yǎng)基含10%FBS，培養(yǎng)時間為16小時。4.如權(quán)利要求1所述的方法，步驟（4）中所述離心為1000rpm，5min，步驟（5）中的EBM-2培養(yǎng)基含有2% FBS。5.如權(quán)利要求1所述的方法，步驟（5）的接種，細胞濃度為10⁶/ml，恒溫箱內(nèi)含有5%CO₂、溫度為37℃，步驟（6）中每3天換一次液，胰酶的濃度為0.25%。6.如權(quán)利要求1所述的方法，步驟（2）中所述胰酶消化是采用分步消化法，每步均置于37℃細胞培養(yǎng)箱中孵育10min，直至組織完全消化。7.如權(quán)利要求1所述的方法，步驟（A）中所述浸泡，浸泡時間為3-5分鐘。8.如權(quán)利要求1所述的方法，步驟（A）中所述孕鼠為孕齡為15-19天的孕鼠。9.如權(quán)利要求1所述的方法，步驟（1）中所述破碎組織，破碎后的組織大小為 0.5-1.0mm³。