本發(fā)明提供一種快速鑒別龍魚種類的PCR試劑盒及方法，所述試劑盒包括：1、3條上游引物和3條下游引物；2、陽性對照品；3、PCR反應液；同時，還提供了一種快速鑒別龍魚種類的方法，1)選擇3條上游引物和3條下游引物；2)制備基因組DNA模板；3)分別在陽性對照的DNA模板和待檢龍魚制備的基因組DNA模板中添加所述上游引物和下游引物進行PCR擴增反應；4)取擴增后的產(chǎn)物5μL點樣于2.5％瓊脂糖凝膠以50bp Marker(條帶50、100、150、200、250、300、350、400、450、500)為標準分子參照，進行電泳；電泳結果用紫外凝膠成像系統(tǒng)分析；5)結果判定。本發(fā)明不僅提高鑒別效率，節(jié)約時間，而且節(jié)省鑒別成本。

1.一種快速鑒別龍魚種類的多重PCR試劑盒，包括：(1)、3條上游引物和3條下游引物；(2)、陽性對照品；(3)、PCR反應液；其中，所述的3條上游引物和3條下游引物的序列分別為：上游引物SF-For：5-CCTATGTACTCACCACCCTAATC-3；下游引物SF-Rev：5'-CTCCTAGGGTAGTGAGAAGGGC-3'；上游引物OB-For：5'-CATATTTCTTAAGGTACTCTG-3'；下游引物OB-Rev：5'-GAATAGCACACCGGTGTAGGAT-3'；上游引物SJ-For：5'GCCTGCTACTGCAGTTGTAGTT 3'；下游引物SJ-Rev-3：5'-GAAAGTCAGGATTATGAAGAT-3'；其中所述的PCR反應液的成分為： 2.根據(jù)權利要求1所述的一種快速鑒別龍魚種類的多重PCR試劑盒，其特征在于，其中所述擴增緩沖液為在25℃，pH值為8.8的100mMTris-HCl；500mM KCl,體積比為0.8％Nonidet P40。3.根據(jù)權利要求1所述的一種快速鑒別龍魚種類的多重PCR試劑盒，其特征在于，其中所述的4種dNTP混合物指：三磷酸腺嘌呤脫氧核苷酸dATP，脫氧胸苷三磷酸dTTP，脫氧鳥苷三磷酸三鈉dGTP，脫氧胞苷三磷酸dCTP。4.根據(jù)權利要求1所述的一種快速鑒別龍魚種類的多重PCR試劑盒，其特征在于，其中所述的陽性對照品為：3種龍魚即亞洲龍魚、銀龍魚和珍珠龍魚的線粒體DNA質粒標準品。5.一種快速鑒別龍魚種類的鑒別方法，其特征在于，包括權利要求1～4中任一項所述的快速鑒別龍魚種類的多重PCR試劑盒，所述方法為：1)選擇3條上游引物和3條下游引物；2)取陽性對照品和待檢龍魚樣本分別制備基因組DNA模板；3)分別在陽性對照的DNA模板和待檢龍魚制備的基因組DNA模板中添加所述上游引物和下游引物進行PCR擴增反應；4)取擴增后的產(chǎn)物5μL點樣于2.5％瓊脂糖凝膠，其中含0.1～0.5μg/mL溴化乙錠，以50bp Marker為標準分子參照，進行電泳；電泳結果用紫外凝膠成像系統(tǒng)分析；5)結果判定，將待檢樣品與陽性對照電泳結果進行比對，確定龍魚種類。6.根據(jù)權利要求5所述的一種快速鑒別龍魚種類的鑒別方法，其特征在于，其中所述的PCR擴增反應按如下條件進行： 7.根據(jù)權利要求5所述的一種快速鑒別龍魚種類的鑒別方法，其特征在于，其中所述的待檢龍魚DNA模板制備的方法為：a.取龍魚組織，加入400μl裂解液混勻，置于37℃水浴1h；b.然后加入200μl 5mol/L的氯化鈉溶液，混勻后進行離心，離心條件13000rpm、15min；c.取上清液，用苯酚抽提2次，氯仿抽提1次；d.加兩倍體積無水乙醇，1/10體積、3mol/L、pH8.0的醋酸鉀，-20℃保存1h；e.對上述溶液進行離心，離心條件13000rpm、15min棄上清液，沉淀物用70％乙醇洗2次；f.置于室溫干燥后，溶于50μlTE溶液中，置4℃保存?zhèn)溆谩?.根據(jù)權利要求7所述的一種快速鑒別龍魚種類的鑒別方法，其特征在于，其中所述的裂解液配方為：40mmol/L Tris-醋酸，20mmol/L醋酸鈉，1mmol/L EDTA，1％十二烷基硫酸鈉，pH7.8。