1.一種利用組織培養技術繁殖平貝母的方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)外植體的選擇與消毒:首先選擇當年生長健壯、無霉爛斑點的新鮮平貝母,剪去根及有傷鱗片,流水沖洗30?min后放入清水中浸泡15min,再用50%多菌靈500倍液浸泡20~30?min或者用50%福美雙粉500倍液浸泡10~15min,然后將種球鱗片剝下,用紫外燈照射10?min,轉入超凈工作臺,再用75%酒精消毒50?s,無菌水沖洗2~3次,再用6%次氯酸鈉溶液消毒10?min,無菌水沖洗2~3次,最后用0.2%的升汞溶液消毒10?min,無菌水沖洗4~5?次;(2)材料處理:首先在超凈工作臺上,在無菌條件下,?切去鱗片上部1/3,然后將中、下部分割開來,將鱗片和鱗莖基部分別切成6-8mm的小塊;(3)初代培養:在無菌的條件下將步驟(2)得到的外植體接種在初代培養基上,該培養基是在3/4MS常規培養基中添加了0.8mg/L的6-BA、1.2mg/L的NAA,30-40mg/L的蔗糖和0.4-0.8mg/L的ZT;培養溫度為24℃,光照時間12?h/d,光照強度2?000?Lux,pH為?6.5,瓊脂5?g/L,經過25-30天形成愈傷組織;(4)繼代培養:將初代培養的愈傷組織切下接種在繼代培養基上,該培養基是在MS常規培養基中添加了0.5mg/L的6-BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖,培養溫度為24℃,光照周期13h/d,光強度為2200lux,pH?6.5,經過7-12天時間分化出綠點后,即開始下一階段;(5)小鱗莖的增殖:將分化出綠點的愈傷組織繼續培養,該培養基是在1/2MS常規培養基中添加了40mg/L的蔗糖、0.3mg/L的KT、0.4mg/LNAA和0.2mg/L的ZT,培養溫度為24℃,光照周期13h/d,光強度為2200lux,pH?6.5,經10-15天培養分化出叢生小鱗莖;(6)生根培養:將分化出來的小鱗莖接種于下列誘導培養基中進行生根誘導:1/2?MS培養基、0.3mg/L的KT、1mg/L的活性炭、7-8g/L的瓊脂、0.5mg/L?的NAA,培養溫度為24℃,光照周期13h/d,光強度為2200lux,經過8-12天待小鱗莖長至2.5cm高,根系比較發達時,即開始下一個階段;(7)煉苗移栽:先將培養瓶移至溫室,自然條件下煉苗6d,然后將長出新根的小鱗莖從培養瓶中取出,在陽光下曬1-2天,在曬的過程中要適當遮光,使光照強度為自然光的60%,溫度在18℃左右,當培養基表面成龜裂狀后,取出小苗洗凈根部附著的培養基,移栽到經消毒的腐殖土∶草炭∶珍珠巖:蛭石=2∶2∶1:3?重量比的混合基質中,溫度控制在15℃左右。2.根據權利要求1所述的一種利用組織培養技術繁殖平貝母的方法,其特征在于,鱗片繁殖材料最佳選擇為內層鱗片的下部。
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