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利用家兔乳腺反應器平臺生產重組人第七凝血因子的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-10
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310342562.X 
  • 技術(專利)名稱 利用家兔乳腺反應器平臺生產重組人第七凝血因子的方法 
  • 項目單位 蘭諾生物技術無錫有限公司
  • 發明人 杜福良,楊瀾,薛非,安禮友 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 孫晨天
  • 發布時間 2021-07-10  
  • 01

    項目簡介

    發明提供了利用家兔乳腺反應器平臺生產重組人第七凝血因子的方法,將重組人第七凝血因子的cDNA導入或整合至家兔的染色體基因中,獲得的轉基因兔在乳腺反應器內表達重組人第七凝血因子蛋白。轉基因兔在乳腺反應器具有較高的重組人第七凝血因子蛋白表達水平、并且蛋白活性好,進而降低生產成本。
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  • 02

    說明書

    1.利用家兔乳腺反應器平臺生產重組人第七凝血因子的方法,其特征在于:將重組人第七凝血因子的cDNA導入或整合至家兔的基因組中,獲得的轉基因兔在乳腺反應器內表達重組人第七凝血因子;其包括以下步驟:(1)將外接信號基因的重組人第七凝血因子的cDNA插入表達載體中形成第七凝血因子的乳腺表達載體,所述表達載體包括調控元件;(2)將乳腺表達載體導入或者整合到家兔的染色體基因中,獲得轉基因兔;(3)獲得的轉基因兔的當代或者后代母兔在泌乳期的乳汁中產生重組人第七凝血因子;所述表達載體為pBC1質粒載體,所述重組人第七凝血因子cDNA為人全序列第七凝血因子cDNA;所述外接信號基因為β-酪蛋白信號肽和hFVII原有的分泌信號肽;所述調控元件包括雞β球蛋白絕緣子,山羊β-酪蛋白啟動子,TATA盒,?β-酪蛋白外顯子1,β-酪蛋白內含子1,?β-酪蛋白外顯子2,β-酪蛋白外顯子7,8,9,β-酪蛋白內含子7,8,β-酪蛋白基因組片段。2.根據權利要求1所述的利用家兔乳腺反應器平臺生產重組人第七凝血因子的方法,其特征在于:所述重組人第七凝血因子的cDNA在限制性內切酶Xho?I多克隆位點插入pBC1載體,所述限制性內切酶Xho?I多克隆位點位于β-酪蛋白外顯子2和β-酪蛋白外顯子7,8,9之間。3.根據權利要求2所述的利用家兔乳腺反應器平臺生產重組人第七凝血因子的方法,其特征在于:在將所述乳腺表達載體導入或者整合到家兔的染色體基因之前,利用Sal?I與Not?I的限性內切酶釋放細菌質粒部分,形成乳腺表達構件,所述乳腺表達構件包括所述調控元件和第七凝血因子cDNA。4.根據權利要求1所述的利用家兔乳腺反應器平臺生產重組人第七凝血因子的方法,其特征在于:所述泌乳期包括人工誘導泌乳期和自然分泌的泌乳期;所述人工誘導泌乳期和所述自然泌乳期包括泌乳前期、泌乳中期和泌乳后期。
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專利技術附圖

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