1.一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包含一個人血清白蛋白
(Albumin human,HSA)、一個血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)和一個
連接肽,HSA通過連接肽與VIP連接;所述VIP位于融合蛋白的N-末端,HSA位于融合蛋白的C-
末端,融合蛋白用結構式表示為VIP-L1-HSA,其中L1表示連接肽,L1的DNA序列為
GGCGGTGGCGGCAGCGGTGGCGGC,氨基酸序列為Gly-Gly-Gly-Gly-Ser-Gly-Gly-Gly。
2.一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包含一個人血清白蛋白
(Albumin human,HSA)、一個血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)和一個
連接肽,所述VIP位于融合蛋白的C-末端,HSA位于融合蛋白的N-末端,融合蛋白用結構式表
示為HSA-L2-VIP,其中L2表示連接肽,L2的DNA序列為GGTGGTGGCGGCAGC,氨基酸序列為Gly-
Gly-Gly-Gly-Ser。
3.根據權利要求1所述的一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于,所述VIP的氨基
酸序列如SEQ ID NO:2所示,編碼所述VIP的氨基酸序列的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。
4.根據權利要求1所述的一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于,所述HSA的氨基
酸序列如SEQ ID NO:4所示,編碼所述HSA的氨基酸序列的DNA序列如SEQ ID NO:3所示。
5.根據權利要求2所述的一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于,所述VIP的氨基
酸序列如SEQ ID NO:8所示,編碼所述VIP的氨基酸序列的DNA序列如SEQ ID NO:7所示。
6.根據權利要求2所述的一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于,所述HSA的氨基
酸序列如SEQ ID NO:10所示,編碼所述HSA的氨基酸序列的DNA序列如SEQ ID NO:9所示。
7.根據權利要求1所述的一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于所述融合蛋白采
用酵母細胞表達制備。
8.根據權利要求7所述的一種血管活性腸肽的融合蛋白,其特征在于所述的酵母為嗜
甲醇畢赤酵母(Pichiapastoris)。
9.一種如權利要求1所述的血管活性腸肽的融合蛋白的制備方法,其特征在于,所述方
法包含以下步驟:
①全基因合成VIP序列;
②通過PCR擴增獲取HSA序列;
③通過限制性內切酶酶切、連接并轉化大腸桿菌,獲得含編碼所述血管活性腸肽的融
合蛋白的氨基酸序列的DNA序列的重組表達載體;
④將步驟③所述的重組表達載體轉化到感受態大腸桿菌TOP10,再轉化到宿主表達系
統進行表達,即得所述融合蛋白。
10.根據權利要求9所述的制備方法,其特征在于,步驟④所述宿主表達系統是酵母。
11.根據權利要求10所述的制備方法,其特征在于,所述的酵母為嗜甲醇畢赤酵母。
12.一種如權利要求2所述的血管活性腸肽的融合蛋白的制備方法,其特征在于,所述
方法包含以下步驟:
(1)所述血管活性腸肽的融合蛋白的動物表達載體的構建
①全基因合成VIP序列;
②通過PCR擴增獲取HSA序列;
③通過限制性內切酶酶切、連接并轉化大腸桿菌,獲得含編碼所述血管活性腸肽的融
合蛋白的氨基酸序列的DNA序列的重組動物表達載體;
(2)所述血管活性腸肽的融合蛋白的酵母表達載體的構建
①通過PCR擴增步驟(1)③中重組動物表達載體獲取HSA-L2-VIP;
②通過限制性內切酶酶切酵母表達載體;
③使用融合PCR技術連接(2)①中HSA-L2-VIP與(2)②中酵母表達載體,并轉化大腸桿
菌,獲得含編碼所述血管活性腸肽的融合蛋白的氨基酸序列的DNA序列的重組酵母表達載
體;
(3)將步驟(2)③所述的重組酵母表達載體轉化到感受態大腸桿菌TOP10,再轉化到酵
母中進行表達,即得所述融合蛋白。
13.根據權利要求12所述的制備方法,其特征在于,所述的酵母為嗜甲醇畢赤酵母。
14.一種含有編碼如權利要求1-6和8中任意一項所述的血管活性腸肽的融合蛋白氨基
酸序列的DNA序列的重組表達載體。
15.一種含有權利要求14所述的重組表達載體的宿主表達系統。
16.權利要求1-6和8中任意一項所述的血管活性腸肽的融合蛋白在制備抗炎、抗損傷、
腦血管疾病、提高睡眠質量的藥物中的應用。
17.權利要求1-6和8中任意一項所述的血管活性腸肽的融合蛋白在制備治療哮喘藥物
中的應用。
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