一種發(fā)酵生產(chǎn)胰島素原的補(bǔ)料培養(yǎng)基及補(bǔ)料培養(yǎng)優(yōu)化方法，屬于微生物工程領(lǐng)域。本發(fā)明針對目前大腸桿菌表達(dá)胰島素原過程中發(fā)酵密度小、表達(dá)量低等不足，提出了一種含有DMEM-高糖培養(yǎng)基的補(bǔ)料培養(yǎng)基，以及一種將這種補(bǔ)料培養(yǎng)基應(yīng)用于大腸桿菌發(fā)酵胰島素原中的分批補(bǔ)料優(yōu)化方法。本法明涉及的培養(yǎng)方法工藝易于控制，通用性強(qiáng)，彌補(bǔ)了大腸桿菌表達(dá)胰島素前體的補(bǔ)料培養(yǎng)基和補(bǔ)料培養(yǎng)優(yōu)化方法。

1.一種發(fā)酵生產(chǎn)胰島素原的補(bǔ)料培養(yǎng)基，其特征在于，它含有蛋白胨200g/L、酵母粉200g/L、硫酸銨50g/L、甘油200mL、DMEM高糖培養(yǎng)基200mL，補(bǔ)足水至1000mL，其中DMEM-高糖培養(yǎng)基含L-谷氨酸胺，不含丙酮酸鈉和碳酸氫鈉。2.一種將權(quán)利要求1所述補(bǔ)料培養(yǎng)基應(yīng)用于發(fā)酵生產(chǎn)胰島素原中的補(bǔ)料優(yōu)化方法，其特征在于，將所述補(bǔ)料培養(yǎng)基分批流加到發(fā)酵液中，其中實時補(bǔ)料流加速率是通過最初補(bǔ)料流加速率和下一時刻的比生長速率μ₀確定的，而μ₀＝（X_n/X₀）^1/n-1，其中X_n=69，X₀為測得的菌體密度，n=T-t₀，T=19，t₀為檢測菌體密度時的發(fā)酵時間。3.如權(quán)利要求2所述的補(bǔ)料優(yōu)化方法，其特征在于，最初補(bǔ)料流加速率為100～400ml·h^-1。4.如權(quán)利要求2所述的補(bǔ)料優(yōu)化方法，其特征在于，最初補(bǔ)料流加速率為200～400ml·h^-1。5.如權(quán)利要求2所述的補(bǔ)料優(yōu)化方法，其特征在于，最初補(bǔ)料流加速率為200ml·h^-1。