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一種重組人促紅素的無血清培養基,其應用以及重組人促紅素的制備方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-09
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201410393381.4 
  • 技術(專利)名稱 一種重組人促紅素的無血清培養基,其應用以及重組人促紅素的制備方法 
  • 項目單位 山西威奇達光明制藥有限公司
  • 發明人 閆亞梅,韓飛宇 
  • 行業類別 藥品-化學藥品
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 秦薈佳
  • 發布時間 2022-02-09  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及生物制藥領域,具體講,涉及一種重組人促紅素的無血清培養基,其應用以及重組人促紅素的制備方法。培養基包括基礎培養基和添加劑,所述添加劑中含有4-羥乙基哌嗪乙磺酸、NaHCO和大豆蛋白水解液;還含有正丁酸鈉、D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖、N-乙酰葡萄糖胺。本發明提高了CHO細胞在無血清培養階段表達量、提高了提高CHO細胞在無血清培養階段表達高活性EPO的比例、延長了細胞在無血清狀態下存活的時間,提高了EPO的產量。
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  • 02

    說明書

    1.一種重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述的培養基中含有基礎培養基和添加劑,所述添加劑中的組成為:濃度為2.0~3.0g/L的4-羥乙基哌嗪乙磺酸、濃度為0.08~0.16g/L的NaHCO3、添加量為100~400ml/L的大豆蛋白水解液,以及正丁酸鈉、D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和N-乙酰葡萄糖胺。2.根據權利要求1所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于:4-羥乙基哌嗪乙磺酸的濃度為2.3~2.7g/L,NaHCO3的濃度為0.10~0.13g/L,大豆蛋白水解液的添加量為200~400ml/L。3.根據權利要求1所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述正丁酸鈉的濃度為0.03g/L~0.2g/L,D-葡萄糖的濃度為1.0g/L~5.0g/L,D-甘露糖的濃度為0.4g/L~2.5g/L,D-半乳糖的濃度為0.4g/L~2.5g/L,N-乙酰葡萄糖胺的濃度為0.4g/L~2.5g/L。4.根據權利要求3所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述正丁酸鈉的濃度為0.08~0.12g/L。5.根據權利要求3所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述D-葡萄糖的濃度為1.5~3.5g/L。6.根據權利要求3所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述D-甘露糖的濃度為0.5~1.5g/L。7.根據權利要求3所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述D-半乳糖的濃度為0.5~1.5g/L。8.根據權利要求3所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述N-乙酰葡萄糖胺的濃度為0.5~1.5g/L。9.根據權利要求1所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,基礎培養基選自CHO?SFM培養基,濃度為10~20?g/L。10.根據權利要求9所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述CHO?SFM培養基的濃度為13~15?g/L。11.根據權利要求1所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述培養基的pH為6.9~7.3,滲透壓摩爾濃度為300~380mOsmol·kg-1。12.根據權利要求11所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述培養基的pH為6.9~7.2。13.根據權利要求11所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述滲透壓摩爾濃度為320~360mOsmol·kg-1。14.根據權利要求1所述的重組人促紅素的無血清培養基,其特征在于,所述大豆蛋白水解液的制備方法為:取大豆蛋白粉100g,加80~85℃熱水800mL,保持恒溫20~30分鐘,調節PH為5.0~7.0,加入2wt%的木瓜蛋白酶100ml,升溫至90~93℃保持20~30分鐘,用5μm的濾器過濾,加水至含氮量為1.0wt%。15.一種如權利要求1~14任一權利要求所述的重組人促紅素的無血清培養基在表達重組人促紅素中的應用。
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專利技術附圖

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