本發(fā)明提供了一種多核苷酸序列，含有該多核苷酸序列的表達(dá)載體pET22b?label 1?linker?fl?linker?label 2，以及含有該表達(dá)載體的大腸桿菌。該大腸桿菌可表達(dá)螢火蟲熒光素酶，該酶的熱穩(wěn)定性較現(xiàn)有螢火蟲熒光素酶提高20?30℃，克服了原有酶熱耐受性問題。

1.一種提高螢火蟲熒光素酶熱穩(wěn)定性的方法，包括在現(xiàn)有熒光素酶f1基因的N端至少
連接如lable 1所述的序列，且在同一基因的C端至少連接如lable 2所述的序列，其特征在
于，lable 1 與lable 2能夠共價結(jié)合，序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.一種能夠表達(dá)合成螢火蟲熒光素酶的多核甘酸序列，其特征在于，其序列如SEQ ID
NO.3所示。
3.含有如權(quán)利要求2所述的多核苷酸序列的重組表達(dá)載體。
4.含有如權(quán)利要求3所述重組表達(dá)載體的大腸桿菌工程菌。
5.一種含有螢火蟲熒光素酶的酶液，其特征在于，由權(quán)利要求4所述的大腸桿菌工程菌
在發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)表達(dá)、純化獲得。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的酶液，其特征在于，該酶液可以在不超過60℃的溫度下，催化
熒光素反應(yīng)產(chǎn)生熒光。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的酶液，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)的培養(yǎng)基為：大豆蛋白胨10~
12 g/L，葡萄糖10~20 g/L，Na₂HPO₄ 4~6 g/L，K₂HPO₄ 1~3 g/L，NH₄Cl 0.5~1 g/L，NaCl 0.1~
0.5 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1~0.5 g/L，AMP，1μL/mL。