本發明涉及一種直投式枯草芽孢桿菌發酵劑及其制備方法，包括枯草芽孢桿菌種子培養、枯草芽孢桿菌高密度放大培養、冷凍干燥法制備菌體發酵劑，最后得到直投式枯草芽孢桿菌發酵劑，所述枯草芽孢桿菌種子培養及高密度放大培養的培養基重量百分比為：蔗糖2，豆粕1，磷酸二氫鉀0.1，硫酸鎂0.05，加水至100％，pH7.0-7.2。冷凍干燥法制備菌體發酵劑濃縮條件為：離心轉速5000r/min，離心10min，離心溫度為4℃，凍干保護劑為5％麥芽糊精、4％蔗糖、0.8％海藻糖、0.2％吐溫。用本方法生產的直投式枯草芽孢桿菌發酵劑的存活率為95.3％，活菌數為2.69×10cfu/g，按照1‰的接種量便可達到理想的液態和固態發酵效果。基于本菌株開發了一種新型高活性的直投式枯草芽孢桿菌發酵劑的制備方法應用于枯草芽孢桿菌相關產品的液態發酵和固態發酵。

1.一種直投式枯草芽孢桿菌發酵劑的制備方法，其特征在于：包括枯草芽孢桿菌種子培
養、枯草芽孢桿菌高密度放大培養、菌體濃縮、加入保護劑、冷凍干燥法制備菌體發酵劑，
最后得到直投式枯草芽孢桿菌發酵劑，所述枯草芽孢桿菌種子培養及高密度放大培養的培養
基重量百分比為：蔗糖2，豆粕1，磷酸二氫鉀0.1，硫酸鎂0.05，加水至100%，pH?7.0-7.2，
菌體濃縮條件為：離心轉速5000r/min，離心10min，離心溫度為4℃，所采用的凍干保護劑
的組成為質量百分比濃度：5%麥芽糊精、4%蔗糖、0.8%海藻糖和0.2%吐溫的水溶液；
所述枯草芽孢桿菌的名稱為TK-1，分類名稱：枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis，保藏編號
為：CGMCCNo.4731，保藏日期：2011年4月2日，保藏地址為：北京市朝陽區北辰西路1
號院3號，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。
2.根據權利要求1所述的直投式枯草芽孢桿菌發酵劑的制備方法，其特征在于：所述種
子培養條件為：37±1℃進行培養，培養時間為20h。
3.根據權利要求1所述的直投式枯草芽孢桿菌發酵劑的制備方法，其特征在于：所述直
投式枯草芽孢桿菌發酵劑中枯草芽孢桿菌的存活率為95.3%，活菌數為2.69×10¹⁰cfu/g。
4.根據權利要求3所述的直投式枯草芽孢桿菌發酵劑的制備方法，其特征在于：所述直
投式枯草芽孢桿菌發酵劑按1‰的接種量應用于液態發酵，最高活菌數為1.03×10¹⁰cfu/mL。
5.根據權利要求4所述的直投式枯草芽孢桿菌發酵劑的制備方法，其特征在于：直投式
枯草芽孢桿菌發酵劑按1‰的接種量應用于固態發酵，最高活菌數為0.985×10¹⁰cfu/g。
6.一種由權利要求1所述制備方法制備獲得的直投式枯草芽孢桿菌發酵劑，其特征在于：
包括凍干保護劑和枯草芽孢桿菌，所述凍干保護劑為5%麥芽糊精、4%蔗糖、0.8%海藻糖、0.2%
吐溫，所述枯草芽孢桿菌的名稱為TK-1，分類名稱Bacillus?subtilis，保藏編號為：CGMCC?No.
4731，保藏日期：2011年4月2日，保藏地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏
單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。