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甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP引物組、檢測方法及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-10
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510612923.7 
  • 技術(專利)名稱 甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP引物組、檢測方法及其應用 
  • 項目單位 廣西壯族自治區農業科學院植物保護研究所
  • 發明人 秦碧霞,李戰彪,謝慧婷,蔡健和,崔麗賢,鄧鐵軍,楊世安 
  • 行業類別 醫療器械-醫療實驗室
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 褚躍德
  • 發布時間 2021-07-10  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種甘蔗線條花葉病毒RT?LAMP引物組、檢測方法及其應用,本發明采用環介導等溫擴增(LAMP)技術,并根據甘蔗線條花葉病毒的CP基因序列設計了相應的RT?LAMP檢測引物組,包括外側引物對F3和B3、內側引物對FIP和BIP,并由此發明了用于檢測甘蔗線條花葉病毒的RT?LAMP檢測方法及試劑盒。本發明甘蔗線條花葉病毒的RT?LAMP檢測方法及試劑盒可快速、準確、簡便地進行病害鑒定,進而采取適當的防治措施,減少病害帶來的損失。
    展開
  • 02

    說明書

    1.甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測引物組,其特征在于:包括外側引物對F3和B3、內側
    引物對FIP和BIP,其分別是為SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的序列。
    2.一種甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法,其特征在于:利用RT-LAMP檢測引物組,在
    63℃恒溫反應條件下,進行環介導恒溫擴增反應60min,擴增完成后80℃再反應5min,然后
    利用瓊脂糖凝膠電泳或熒光染色,鑒定植株樣品是否感染甘蔗線條花葉病毒;所述的RT-
    LAMP檢測引物組包括外側引物對F3和B3、內側引物對FIP和BIP,其分別是為SEQ ID No.1至
    SEQ ID No.4所示的序列。
    3.根據權利要求2所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法,其特征在于:所述的外
    側引物對、內側引物對的濃度比為1:4。
    4.根據權利要求2或3所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法,其特征在于:所述的
    外側引物對、內側引物對的濃度分別為0.2μM和0.8μM。
    5.一種甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:包括A試液、B試液和C試
    液;所述的A試液為LAMP反應體系,其中含有RT-LAMP buffer、MMLV-Bst混合液、RNase
    Inhibitor、RNase-Free Water和RT-LAMP檢測引物組;所述的B試液含甘蔗線條花葉病毒
    RNA;所述的C試液為RNase free Water;所述的RT-LAMP檢測引物組,包括外側引物對F3和
    B3、內側引物對FIP和BIP,其分別是為SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的序列。
    6.根據權利要求5所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:所述的A
    試液中含RT-LAMP buffer 4μL、MMLV-Bst混合液1.5μL、RNase-Free Water 11.5μL、RNase
    Inhibitor 1μL、RT-LAMP檢測引物組5μL,其中F3和B3引物各0.5μL,終濃度均為0.2μM;FIP
    和BIP引物各2μL,終濃度均為0.8μM;所述的引物F3、B3、FIP和BIP分別是為SEQ ID No.1至
    SEQ ID No.4所示的序列。
    7.根據權利要求5或6所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑盒,其特征在于:所述
    的B試液作為陽性對照;所述的C試液作為陰性對照。
    8.根據權利要求1所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測引物組、權利要求2所述的甘
    蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測方法或權利要求5所述的甘蔗線條花葉病毒RT-LAMP檢測試劑
    盒在感病甘蔗上檢測甘蔗線條花葉病毒的應用。
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專利技術附圖

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