本發(fā)明涉及用于快速檢測(cè)克羅諾桿菌屬細(xì)菌的寡核苷酸引物對(duì)及探針以及包含所述引物對(duì)和探針的試劑盒。本發(fā)明涉及利用所述引物對(duì)和探針或試劑盒快速檢測(cè)克羅諾桿菌屬細(xì)菌的實(shí)時(shí)熒光PCR方法。本發(fā)明還涉及所述引物對(duì)和探針或試劑盒在檢測(cè)克羅諾桿菌屬細(xì)菌中的應(yīng)用。利用本發(fā)明可以高特異、高靈敏度的快速檢測(cè)克羅諾桿菌。

1.用于通過實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)克羅諾桿菌屬細(xì)菌的寡核苷酸引物
對(duì)及探針，其中所述引物對(duì)的序列為SEQ?ID?No.s?1和2，所述探針的序列為
SEQ?ID?No.3。
2.權(quán)利要求1所述的引物對(duì)和探針，其中，所述探針為Taqman探針。
3.權(quán)利要求2所述的引物對(duì)和探針，其中，在探針的3’末端連接有熒光
淬滅基團(tuán)，5’末端連接有熒光報(bào)告基團(tuán)。
4.權(quán)利要求3所述的引物對(duì)和探針，其中，所述熒光淬滅基團(tuán)為BHQ、
BHQ1、BHQ2或TAMRA，所述熒光報(bào)告基團(tuán)為FAM、CY3、CY5、HEX
或TET。
5.用于通過實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)克羅諾桿菌屬細(xì)菌的試劑盒，其中
所述試劑盒包括權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物對(duì)和探針。
6.權(quán)利要求5所述的試劑盒，其還包括用于提取克羅諾桿菌屬細(xì)菌DNA
的試劑、用于實(shí)時(shí)熒光PCR的試劑、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照以及使
用說明書。
7.通過實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)克羅諾桿菌屬細(xì)菌的方法，所述方法包
括使用權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物對(duì)和探針或者權(quán)利要求5-6中任一項(xiàng)
所述的試劑盒，所述方法不用于疾病診斷和治療目的。
8.權(quán)利要求7所述的方法，包括步驟：
(a)從待測(cè)產(chǎn)品中提取DNA樣品；
(b)提供實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)的條件；
(c)使用權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物對(duì)和探針或權(quán)利要求5-6中任一
項(xiàng)所述的試劑盒，通過實(shí)時(shí)熒光PCR方法進(jìn)行核酸擴(kuò)增反應(yīng)和檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)
物。
9.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的引物和探針或者權(quán)利要求5-6中任一項(xiàng)所
述的試劑盒在檢測(cè)克羅諾桿菌屬細(xì)菌的應(yīng)用，所述應(yīng)用不用于疾病診斷和治
療目的。