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一種波棱瓜種子DNA提取液、提取試劑盒及其應用和提取方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-06-25
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201911028306.7 
  • 技術(專利)名稱 一種波棱瓜種子DNA提取液、提取試劑盒及其應用和提取方法 
  • 項目單位 云南師范大學
  • 發明人 孟麗華,陳珠慶,李婷 
  • 行業類別 中藥材獲取-非動植物采選
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 孫逸娜
  • 發布時間 2021-06-25  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供了一種波棱瓜種子DNA提取液、提取試劑盒及其應用和提取方法,涉及DNA提取技術領域。本發明所述DNA提取液中包括:100mmol/L的Tris?HCl,24mmol/L的EDTA和質量體積比為2.4%的SDS;所述Tris?HCl的pH值為8.0。本發明所述DNA提取液、提取試劑盒和提取方法可用于提取脂肪含量高的波棱瓜種子DNA,且提取得到的DNA純度高,條帶均一且不拖帶,還具有成本低的優點。
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  • 02

    說明書

    1.一種波棱瓜種子DNA的提取方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)將波棱瓜種子用液氮研磨后的粉末與65℃預熱的所述DNA提取液混合后,65℃水浴35min,得勻漿;所述DNA提取液中包括:100mmol/L的Tris-HCl,24mmol/L的EDTA和質量體積比為2.4%的SDS;所述Tris-HCl的pH值為8.0;(2)將所述勻漿與混合液等體積混合后,靜置8min,4℃14000rpm離心10min;所述混合液包括體積比為24:1的氯仿和異戊醇;(3)將步驟(2)所述離心后的上清液與所述混合液混合,靜置8min,4℃14000rpm離心10min;(4)將步驟(3)所述離心后的上清液與無水乙醇混合后,靜置15min,4℃8000rpm離心10min,棄上清;(5)將步驟(4)所述離心后得到的沉淀與體積比為70%的乙醇混合洗滌,4℃12000rpm離心4min,棄上清;(6)將步驟(5)所述離心后得到的沉淀晾干,與8mM NaOH溶液混合后,溶解8~12h,用TE緩沖液調pH至7~8。2.根據權利要求1所述提取方法,其特征在于,步驟(1)所述粉末與DNA提取液的質量體積比為0.04g:700μL。3.根據權利要求1或2所述提取方法,其特征在于,在步驟(1)中所述水浴過程中,每隔10min進行一次顛倒混勻。4.根據權利要求1所述提取方法,其特征在于,步驟(5)所述洗滌進行2次。
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