一種利用混合抗菌劑進行萊茵衣藻培養過程中的除菌方法，屬于萊茵衣藻除細菌與真菌的方法。方法：A.將混合雜菌污染的衣藻接種到TAP固體培養基平板上，在23±0.5℃，14/10小時明暗光周期，8000Lx光強下培養3?5天；B.配制10ug/ml嘧菌酯和15ug/ml萘啶酮酸的混合抗菌劑TAP固體培養基平板待用；C.將已經培養好的含雜菌的衣藻轉接劃線至含有混合抗菌劑的TAP平板上，在23±0.5℃，14/10小時明暗光周期，8000Lx光強下培養5?8天；D.將已經除過菌的衣藻再次轉接劃線至普通的TAP固體培養基平板上，在23±0.5℃，14/10小時明暗光周期，8000Lx光強下培養3?5天，進行后續實驗或者保種備用。優點是利用嘧菌酯去除真菌、萘啶酮酸去除細菌，解決利用萊茵衣藻進行科學實驗與應用過程中產生的雜菌污染問題。

1.一種利用混合抗菌劑進行萊茵衣藻培養過程中的除菌方法，其特征是：雜菌污染的
衣藻轉接劃線至含有混合抗菌劑的TAP固體培養基平板上，在23±0.5℃，14/10小時明暗光
周期，8000Lx光強下進行除菌培養5-8天，實現衣藻的除菌；所述的混合抗菌劑包括：10 ug/
ml抗真菌劑和15 ug/ml抗細菌劑；所述的抗真菌劑為嘧菌酯，抗細菌劑為萘啶酮酸；
所述的衣藻即實驗藻種為：萊茵衣藻，即Chlamydomonas reinhardtii；
所述TAP固體培養基平板為：TAP鹽溶液25 ml/L，磷酸鹽溶液0.375 ml/L，Hutner微量
元素1 ml/L，乙酸1 ml/L，Tris 2.42 g/L，瓊脂粉15 g/L，121℃高壓蒸汽滅菌20 min，倒平
板備用；所述的TAP鹽溶液為：NH₄Cl 15 g/L, MgSO₄?7H₂O 4 g/L, CaCl₂?2H₂O 2 g/L；所述
的磷酸鹽溶液為：K₂HPO₄ 288 g/L, KH₂PO₄ 144 g/L；Hutner微量元素為：EDTA二鈉鹽 50
g/L, ZnSO₄?7H₂O 22 g/L, H₃BO₃ 11.4 g/L, MnCl₂?4H₂O 5.06 g/L, CoCl?6H₂O 1.61 g/
L, CuSO₄?5H₂O 1.57 g/L, (NH₄)₆Mo₇O₂₄?4H₂O 1.1 g/L, FeSO₄?7H₂O 4.99 g/L，用KOH 或
者HCl 調節pH至7.0；
所述的含有混合抗菌劑的類型、濃度與使用方法為：抗真菌劑嘧菌酯使用終濃度10
ug/ml，在上述TAP固體培養基配制時添加，抗細菌劑萘啶酮酸使用終濃度15 ug/ml，在上述
TAP固體培養基配制滅菌以后，冷卻至約55℃后添加。